發(fā)布時(shí)間：2018-12-07
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酒制及超微粉碎對當(dāng)歸散中黃芩甙溶出效果的影響
王愛武1 耿軍1魏巍2
（1、 山東省立醫(yī)院，山東 濟(jì)南250021；2、山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東 濟(jì)南250014）
[摘要]目的：比較酒制及超微粉碎對當(dāng)歸散中黃芩甙溶出量的影響。方法：高壓液相色譜法。色譜柱為ODS-C18柱，流動相為甲醇-水冰醋酸（47：53：0.1），檢測波長280nm，流速為0.8ml˙min-1，柱溫為室溫。結(jié)果：酒制對當(dāng)歸散中黃芩甙溶出幾乎無影響，超微粉碎可增加黃甙的溶出。結(jié)論：對當(dāng)歸散中黃芩溶出量而言，酒制意義水大，超微粉碎有重要意義。
[關(guān)鍵詞]酒制；當(dāng)歸散；黃芩甙
[中圖類號]R282.710.2 [文獻(xiàn)識碼]B [文章編號]0257-358X（2001）04-0237-02
當(dāng)歸散源于《金匱要略》，有當(dāng)歸、川芎、黃芩、白芍、白術(shù)組成，全方具養(yǎng)血健脾、清熱安胎之功，為中醫(yī)婦科常用方劑。原方系生飲片制散，用酒送服。經(jīng)歷代演變，方中除白術(shù)外，其余四藥均衍化為酒制品。曾有酒制對復(fù)方中阿魏酸、芍藥甙等成分溶出效果比較的報(bào)道[1]，未見有對黃芩甙溶出量的研究。鑒于黃芩是方中清熱安胎的主要藥物，本文就酒制對黃芩甙的溶出量進(jìn)行了比較，旨在全面衡量酒制的意義。另據(jù)報(bào)道，超微粉碎技術(shù)在完善中藥炮制技術(shù)、改善中藥固體制劑的品質(zhì)方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢和廣闊的應(yīng)用前景[2]，本文引入這一技術(shù)，研究其對當(dāng)歸散中黃芩甙溶出的影響，從另一方面探討當(dāng)歸散炮制及制劑的意義。
1儀器與材料
儀器：Water 2690型高效液相色譜儀及996型二極管陣列檢測器，SQW-6型超微粉碎機(jī)，SB 2200型超聲波發(fā)生器（上海必能信超聲有限公司生產(chǎn)），電子分析天平MET-TIER 240（瑞士生產(chǎn)）。
試藥與試劑：生當(dāng)歸散及酒制當(dāng)歸散由本院中藥制劑室提供。超細(xì)生當(dāng)歸散由山東省醫(yī)藥工業(yè)研究所采用超微粉碎技術(shù)制成。黃芩甙對照品由中國藥品生物制品鑒定所提供。所用試劑，甲醇為色譜純，水為生重蒸餾水，冰醋酸及乙醇為分析純。
2實(shí)驗(yàn)方法
2.1色譜條件 ODS-C18柱（4.6mm×150mm，5µm），流動相為甲醇-水-冰醋酸（47：53：0.1）檢測波長為280nm，流速為0.8ml˙min-1，柱溫為室溫。
2.2黃芩甙標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密稱取黃芩甙對照品適量，用甲醇溶解并稀釋成濃度為40µg˙ml-1的溶液，精密吸取對照品溶液0.63，1.25，2. 00，2.50，3.75，5.00 ml，加甲醇稀釋至5 ml，搖勻，分別吸取上述各液10µl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積Y對進(jìn)樣濃度X作線性回歸，得回歸方程為Y=30199.45X+5601.98，γ=0.9998，黃芩甙對照品在進(jìn)樣量0.05～0.40µg范圍內(nèi)成良好的線性關(guān)系。
2.3樣品溶液的制備與測定 取每種樣品1g，精密稱定，加50%甲醇50ml，超聲提取20min，過濾。取濾液1ml，加50%甲醇稀釋定容至10ml,用0.45的微孔濾膜過濾，吸取2ml至自動進(jìn)樣閥中進(jìn)樣，按上述色譜條件，記錄黃芩甙的峰面積，按外標(biāo)法計(jì)算含量。
2.4實(shí)驗(yàn)方法的精密度、重現(xiàn)性與穩(wěn)定性 取同一對照品溶液，平行測定5次，記錄峰面積，RSD為1.72%，說明精密度好。取同一批樣品5份，照樣品測定法測定，RSD為1.56%，說明重現(xiàn)性好。取同一份樣品液分別在0，2，4，6，8hr進(jìn)樣測定，峰面積基本不變，RSD為1.6%。
3實(shí)驗(yàn)結(jié)果
取同一種樣品5份，照樣品測定法項(xiàng)目操作，結(jié)果見表1。
表1樣品中黃芩甙含量
m/µg˙mg-1
黃芩甙含量（χ） 平均值
酒制當(dāng)歸散 25.993 26.401 26.578 27.054 26.695 26.544
生當(dāng)歸散 26.426 26.941 27.436 27.182 26.702 26.937
超細(xì)生當(dāng)歸散 31.472 31.530 32.093 32.125 31.350 31.714
從表1可看出，當(dāng)歸散經(jīng)酒制后，黃芩甙的溶出略有降低，經(jīng)超細(xì)處理后，黃芩甙的溶出明顯增加。
4、討論
當(dāng)歸散原方為生藥散，即用酒沖服，后世將當(dāng)歸、川芎、白芍、黃芩酒制后配方入藥，用水沖服，有研究認(rèn)為，四藥酒制除對總煎出物略呈助溶作用外，其余5種成分（還原糖、蛋白質(zhì)、揮發(fā)油、阿魏酸、芍藥甙）的溶出均低于生品配方[1]。本研究結(jié)果進(jìn)一步提示，當(dāng)歸散用現(xiàn)行酒制品配方，沒有顯示對復(fù)方成分在體內(nèi)的溶出是一個(gè)復(fù)雜的過程，體外試驗(yàn)與體內(nèi)溶出有一定差距。中藥經(jīng)酒制后，其溶液的顏色及味道確實(shí)發(fā)生了變化，對于酒制品的取舍問題，還有待藥理及臨床驗(yàn)證。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)歸散經(jīng)超微粉碎后，黃芩甙的溶出量明顯增加，這與文獻(xiàn)報(bào)道的“細(xì)胞經(jīng)破壁后，細(xì)胞內(nèi)的有效成分充分暴露出來，藥物的釋放速度及釋放量會大幅度提高”[3]是致的。當(dāng)歸散中含有多種有效成分，其他諸如芍藥甙、阿魏酸等是否與黃芩甙呈現(xiàn)相關(guān)變化，有待進(jìn)一步研究。當(dāng)然，對當(dāng)歸散進(jìn)行超微粉碎的最終目的是為提高生物利用度和療效，這一點(diǎn)有待藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)來證明。
[參考文獻(xiàn)]
[1]呂文海,董祺.有同用酒方法對當(dāng)歸散成分溶出效果的比較[J].山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，1997，21（1）：69.
[2]王愛武，呂文海，耿暉.超微粉碎在中藥生產(chǎn)應(yīng)用概括及展望[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，2000，11（7）：669.
[3]郭琪、杜曉敏.中藥細(xì)胞級微粉碎對體內(nèi)吸收的影響[J].中成藥，1999，21（11）：601.
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